暗场显微镜的原理和使用方法

暗视野显微镜的原理和使用方法

暗视野显微镜也称暗场显微镜，是比较特殊的光学显微镜之一，其工作原理及其结构特点比较特殊，因此，很多人不是很了解，下面就让沃德普小编来给大家介绍一下暗视场显微镜的原理及结构特点，还有其使用方法。

（一） 原理和结构特点

    在日常生活中，室内飞扬的微粒灰尘是不易被看见的，但在暗的房间中若有一束光线从门缝斜射进来，灰尘便粒粒可见了，这是光学上的丁达尔现象。

    暗视野显微镜就是利用此原理设计的。它的结构特点主要是使用中央遮光板或暗视野聚光器，常用的是抛物面聚光器，使光源的中央光束被阻挡．不能由下而上地通过标本进入物镜。从而使光线改变途径，倾斜地照射在观察的标本上，标本遇光发生反射或散射，散射的光线投入物镜内，因而整个视野是黑暗的。

    在暗视野中所观察到的是被检物体的衍射光图像．并非物体的本身，所以只能看到物体的存在和运动，不能辨清物体的细微结构。但被检物体为非均质时，并大于1／2波长，则各级衍射光线同时进入物镜，在某种程度上可观察物体的构造。一般暗视野显微镜虽看不清物体的细微结构，但却可分辨0.004um以上的微粒的存在和运动，这是普通显微镜（最大的分辨力为0.2um）所不具有的特性。

（二）使用方法

1．把暗视野聚光器装在显微镜的聚光器支架上。

2．选用强的光源，但又要防止直射光线进入物镜，所以一般用显微镜灯照明。

3．在聚光器和标本片之间要加一滴香柏油，目的是不使照明光线于聚光镜上面进行全反射，达不到被检物体，而得不到暗视野照明。

4．升降集光器，将集光镜的焦点对准被检物体，即以圆锥光束的顶点照射被检物。如果聚光器能水平移动并附有中心调节装置，则应首先进行中心调节，使聚光器的光轴与显微镜的光轴严格位于一直线上。

5．选用与聚光器相应的物镜，调节焦距（操作方法与普通显微镜相同＝找到所需观察的物像。）